1989 год.
Это события из оригинальной истории. Ученые, изучавшие гепатит С, после долгих лет исследований наконец преуспели в определении последовательности нуклеотидов вируса гепатита С.
Они извлекли около миллиона фрагментов РНК из крови шимпанзе, ввели этот генетический материал в рекомбинантные Бактерии, синтезировали белки, а затем подвергли их реакции с антителами из сыворотки крови пациентов с гепатитом С.
Поскольку было неизвестно, какой именно из плавающих в крови фрагментов РНК принадлежит вирусу, они синтезировали все миллион фрагментов.
Это невероятно сложная история.
Что это значит? Это значит, что потребовался миллион штаммов рекомбинантных Бактерий, каждая из которых была запрограммирована на синтез своего белка.
Это означает, что исследователи повторили эксперимент по созданию Бактерий, синтезирующих специфический белок, и проверке этого белка на реакцию с антителами целых миллион раз...
На одно только это ушло семь лет.
Ведь они не знали, где именно в крови прячется вирус гепатита С.
Однако.
Мы только что, благодаря тому, что увидели под электронным микроскопом, выяснили, что вирус гепатита С секретируется в виде липопротеинов.
Нет нужды просеивать миллионы фрагментов РНК, находящихся в крови пациента. Достаточно работать только с теми фрагментами РНК, что содержатся в липопротеинах пациента.
Вероятно, их всего около сотни.
Если знать только это, можно сократить время на поиски генетического материала вируса гепатита С в тысячи раз!
***
Доктор Алтер тяжело вздохнул.
Казалось, он достигал предела того, что был способен сделать. Все-таки охота за призраками — дело не из легких.
Пока он предавался раздумьям, его мысли прервал писк факса в углу лаборатории. Доктор Алтер посмотрел на распечатанный лист.
Факс из Стэнфорда?
Разве оттуда могли прийти какие-то новости?
— Здравствуйте, доктор Алтер.
— Есть способ обнаружить вирус, являющийся причиной посттрансфузионного гепатита, еще до конца этого года.
Сразу к делу. Доктор Алтер долго смотрел на этот факс.
Почему-то это кажется знакомым... А!
Это тот самый человек. Среди светил медицинского сообщества ходили слухи, что в Стэнфорде есть одна странная исследовательская группа.
***
Я тут же собрал охапку литературы и сел в самолет, направляющийся в Мэриленд. Вопрос не терпел отлагательств.
В этот раз я поехал один.
Декан, профессор Рич, конечно, отпустил пару колкостей в духе: «Опять на семинар собрался?», но я лишь пожал плечами.
— Профессор, вы же помните, что открытие Синдрома токсического шока и Легионеллеза принесло Стэнфорду миллионы долларов исследовательских грантов?
Профессору Ричу пришлось признать это.
— В этот раз может быть даже больше.
Процесс убеждения был очень коротким.
И вот так...
Я ступил на порог здания Национальных институтов здравоохранения в Мэриленде. Поскольку это федеральный объект, охранники преградили мне путь.
— По какому вы вопросу?
Я порылся в сумке и достал пригласительное письмо.
— Я пришел встретиться с доктором Алтером.
— А! Вы мистер Паркс. Пройдемте со мной. Я провожу вас в лабораторию.
Словно знали, что я приду.
Через несколько минут я вошел в один из семинарских залов в глубине здания Национальных институтов здравоохранения и вскоре встретился с доктором Алтером. Увидев меня, он почти подбежал и протянул руку для рукопожатия.
— Здравствуйте, мистер Паркс.
— Рад встрече.
Харви, доктор Алтер.
Исследователь, который в будущем получит Нобелевскую премию за открытие вируса гепатита. Он кивнул с радостным выражением лица.
— Для меня честь познакомиться с вами.
— О, благодарю.
Мы сели в семинарском зале, где стояла доска. Доктор Алтер не производил впечатления человека, который много говорит, но он говорил много.
— Я прочитал немало ваших Научных статей, и они заставили меня усомниться, под силу ли такое человеческому разуму.
Я неловко почесал затылок.
Это ведь был комплимент, да?
— Да, ну...
— Вы утверждаете, что можно выделить штамм, являющийся причиной посттрансфузионного гепатита? Мой ум отказывается понимать, как это возможно при нынешних технологиях.
Я посмотрел на доктора Алтера.
— Центрифуга.
У него было непонимающее выражение лица.
Взгляд говорил: «Не может же загадочный вирус, который мы четыре года не могли выделить, отделиться с помощью центрифуги?»
— Что это значит...?
— Если это болезнь, передающаяся через кровь, значит, вирус находится в крови. Вы задумывались, где именно в крови он может быть?
— Хм. Где в крови находится вирус NANBH? Разве он не плавает отдельно? Разве он не дрейфует в плазме?
Я покачал головой.
— Если бы это был обычный вирус, то да. Но чертов NANBH не такой.
Он смотрел с недоверием. Я достал из портфеля пленку.
Три снимка с электронного микроскопа, сделанные ранее, на которых были запечатлены клетки печени пациента с гепатитом С.
Те самые фотографии, из которых можно было сделать вывод, что вирус гепатита С синтезируется в эндоплазматическом ретикулуме, собирается в липидных каплях, а затем секретируется.
Я показал эту пленку доктору Алтеру. На структуры, предположительно являющиеся вирусом гепатита B, я наклеил красные стикеры-стрелочки.
Доктор Алтер — светило, которое получит Нобелевскую премию.
К тому же он потратил несколько лет на изучение этого вируса. Даже беглого взгляда было достаточно, чтобы понять, что к чему.
Стоило ему увидеть пленку, а точнее — стикеры на ней, как его глаза расширились.
— А!
— Как видите, готовые вирусные частицы готовы к выходу из клетки через гладкий эндоплазматический ретикулум. Вещество, опосредующее секрецию вируса здесь — это...
— Неужели липопротеины?
Доктор Алтер издал короткий вскрик. Он был почти на грани слез.
— Верно.
— А, вот почему центрифуга...
Почему он так взволнован из-за липопротеинов?
Все просто. В оригинальной истории, чтобы найти вирус гепатита С, семь лет заражали шимпанзе, брали у них кровь и заставляли Бактерии синтезировать миллион фрагментов генов.
Даже сам доктор Алтер последние четыре года боролся с шимпанзе, пытаясь найти этот вирус. Но...
Если вирус находится внутри липопротеинов, все меняется.
Липопротеины — это крошечные капли жира, плавающие в крови.
Если подумать о выделении этого вируса из крови? В оригинальной истории NANBH был определен как болезнь в 1974 году.
А вирус гепатита С был полноценно выделен лишь 15 лет спустя.
Это была задача, граничащая с невозможностью.
Но... если выделить из крови пациента только липопротеины? На это уйдет столько же времени, сколько на приготовление лапши. Нужно просто прокрутить кровь в центрифуге.
***
Даже по моим меркам это довольно круто.
Потому что...
В современных учебниках медицины даже не написано, как можно было бы обнаружить гепатит С с помощью технологий 1978 года.
Это придумал я.
Доктор Алтер достал носовой платок и вытирал слезы умиления.
— Большое спасибо, доктор Паркс. С этим методом мы сможем найти этот чертов вирус-призрак в течение нескольких лет.
Я почесал затылок.
— Нескольких лет?
— Нескольких лет будет достаточно, мистер Паркс.
— Хм.
Он продолжил с радостным выражением лица:
— Нужно просто выделить липопротеины из крови пациента, извлечь из этого Образца мРНК и синтезировать белки. Затем сопоставить их с анти-NANBH антителами, полученными из сыворотки пациента...
Ого, вот так? Я, честно говоря, был поражен.
За такое короткое время он сразу догадался о методе, который использовали в оригинальной истории. Или, может, он уже давно об этом мечтал?
Хотя он, безусловно, проницателен, есть один факт, который доктор Алтер пока упускает из виду.
Я снова покачал головой.
— Доктор Алтер. В этом нет необходимости.
— Почему...?
— Свободная мРНК внутри плазмы — вещество с очень высокой летучестью.
К слову, мРНК — это молекула, содержащая генетическую информацию для синтеза белка.
Давайте представим, что это заказ в ресторане.
— Верно. Поэтому нужно брать плазму зараженного шимпанзе и использовать ее немедленно. Иначе ничего не выйдет.
Я снова почесал затылок.
— Доктор Алтер. Свободная мРНК в плазме распадается и исчезает естественным образом через несколько дней, но сам вирус гепатита держится долго. Подумайте хорошенько.
— А?
От моих слов доктор Алтер снова погрузился в глубокие раздумья. Это была задача на арифметику.
Первый метод.
Извлечь весь генетический материал из всей плазмы пациента и проверять каждый фрагмент, чтобы понять, какой из них принадлежит вирусу гепатита.
Обычно в крови человека плавают миллионы видов мРНК. Если это пациент с гепатитом, то несколько из этих фрагментов мРНК будут генетическим материалом вируса гепатита.
Фрагментов для проверки: 1 000 000. Ожидаемое время: около 10 лет.
Это метод, который использовали в оригинальной истории.
Второй метод.
Из плазмы пациента выделить только частицы липопротеинов, в которых, как предполагается, находится вирус. Извлечь из них весь генетический материал и проверить.
Фрагментов для проверки: 100 000. Ожидаемое время: около 1 года.
Третий метод.
Свободно плавающий генетический материал распадается и исчезает за несколько дней!
С другой стороны, генетический материал внутри вируса держится месяцами. Так что если просто использовать Образец, который постоял несколько дней?
Вирус находится внутри липопротеинов.
Центрифугируем кровь, выделяем только липопротеины и ждем, пока свободно плавающий генетический материал распадется сам по себе.
Тогда в готовом Образце останется почти только генетический материал вируса гепатита С.
Фрагментов для проверки: 100. Ожидаемое время... ну, где-то послезавтра?

Комментарии

Загрузка...